FRAT2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406802

Übersicht

FRAT2 (Frequently rearranged in advanced T-cell lymphomas 2) kodiert ein zytoplasmatisches Protein, das die kanonische Wnt/β-Catenin-Signalübertragung moduliert, indem es mit GSK3β interagiert und die Stabilität von β-Catenin sowie nachgeschaltete Transkriptionsprogramme beeinflusst. Über diesen Signalweg trägt FRAT2 zur Regulation von Zellproliferation, Differenzierung und Entwicklungsmusterbildung bei und kann mit breiteren Signalnetzwerken verknüpft sein, die den Zellzyklus und Schicksalsentscheidungen steuern. Eine veränderte Aktivität des Wnt-Signalwegs ist in zahlreichen Krankheitskontexten beteiligt, darunter onkogene Transformation und Gewebeumbau, was FRAT2 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Analyse β-Catenin-abhängiger Genexpression macht. Die funktionelle Untersuchung von FRAT2 unterstützt mechanistische Studien zur Signalweg-Überkreuzregulation (Crosstalk) und zur kontextspezifischen Regulation in humanen Zellsystemen.

Das FRAT2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des FRAT2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des FRAT2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von FRAT2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die FRAT2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von FRAT2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der FRAT2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf FRAT2-Exone abzielen, die für die FRAT2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere FRAT2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom FRAT2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom FRAT2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des FRAT2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das FRAT2 HDR-Plasmid (h) und FRAT2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von FRAT2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten FRAT2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.