FRAT1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406922

Descripción general

FRAT1 (frequently rearranged in advanced T-cell lymphomas 1) codifica un regulador positivo de la vía Wnt/β-catenina que potencia la salida de señalización mediante la inhibición de eventos de fosforilación dependientes de GSK3, estabilizando así la β-catenina y reforzando programas transcripcionales vinculados a la proliferación y la diferenciación. Al modular componentes citoplasmáticos y nucleares de la señalización Wnt, FRAT1 influye en decisiones de destino celular, la progresión del ciclo celular y el control de la migración dependiente del contexto. Se ha descrito una expresión alterada de FRAT1 en múltiples tipos de tumores y con frecuencia se estudia como un nodo que conecta la actividad de la vía Wnt con redes transcripcionales oncogénicas. Por ello, FRAT1 es relevante para analizar el crosstalk entre vías que afecta estados tipo célula madre, programas asociados a la transición epitelio-mesénquima y la regulación transcripcional dependiente de señales en células humanas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FRAT1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FRAT1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FRAT1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FRAT1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FRAT1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FRAT1 para la investigación de la señalización de FRAT1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FRAT1 críticos para la función de FRAT1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FRAT1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FRAT1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FRAT1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FRAT1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FRAT1 (h) y el plásmido HDR FRAT1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FRAT1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FRAT1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.