follistatin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420417

개요

마우스 Fst 유전자는 follistatin을 암호화하는데, follistatin은 분비형 당단백질로서 TGF-β 슈퍼패밀리 리간드에 결합해 이를 중화하며, 특히 activin과 여러 BMP에 대해 그 작용이 두드러집니다. 그 결과 SMAD2/3 및 SMAD1/5/8 의존적 전사 프로그램을 조절합니다. 리간드의 이용 가능성을 제한함으로써 follistatin은 근육, 생식, 대사 시스템 전반에서 세포 운명 결정, 조직 성장, 그리고 재생·수복 과정에 영향을 미칩니다. Fst 활성은 근형성(myogenesis)과 섬유화 관련 리모델링에 영향을 주며, activin–follistatin 균형의 이상은 근감소, 염증 신호전달, 생식 관련 표현형 등의 맥락에서 연구되고 있습니다. 성장인자 신호전달의 핵심 세포외 조절자로서 Fst는 발생 및 항상성 회로에서 경로 간 크로스토크와 피드백을 규명하기 위한 다루기 쉬운 분석 지점을 제공합니다.

follistatin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Fst 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Fst 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Fst의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 follistatin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 follistatin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Fst 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• follistatin 기능에 중요한 Fst 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Fst 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• follistatin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 follistatin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Fst 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  follistatin HDR 플라스미드 (m) 및 follistatin HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Fst 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Fst 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.