Plasmide Double Nickase (h) folliculin: sc-403316-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) folliculin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide folliculin Double Nickase (h) et le plasmide folliculin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FLCN. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: folliculin Antibody (D-4): sc-271558
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) folliculin | sc-403316-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) folliculin | sc-403316-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FLCN code la folliculine, une protéine associée à une fonction de suppresseur de tumeur, qui coordonne la détection des nutriments, la signalisation lysosomale et le métabolisme cellulaire via des interactions avec FNIP1/2 et la régulation des voies AMPK–mTORC1 et des GTPases Rag. La folliculine contribue au contrôle de l’autophagie, à l’homéostasie mitochondriale et à des programmes transcriptionnels liés à TFEB/TFE3, influençant la biogenèse des lysosomes et les réponses au stress. Des variants entraînant une perte de fonction de FLCN sont impliqués dans le syndrome de Birt–Hogg–Dubé et sont associés à une prédisposition aux tumeurs rénales et à la formation de kystes pulmonaires, faisant de FLCN un nœud clé pour l’étude des mécanismes reliant génotype et phénotype. La modulation expérimentale de la folliculine soutient l’exploration de l’homéostasie énergétique, du contrôle de la croissance cellulaire et de la différenciation épithéliale, en lien avec la biologie des maladies.
folliculin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FLCN dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FLCN. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FLCN. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FLCN.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.