FBXO34 Plasmide Double Nickase (h): sc-412420-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FBXO34 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FBXO34 Double Nickase Plasmid (h) e il FBXO34 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FBXO34. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FBXO34 Plasmide Double Nickase (h) | sc-412420-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FBXO34 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-412420-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FBXO34 codifica una proteina F-box che si prevede funzioni come componente di riconoscimento del substrato dei complessi ligasi E3 dell’ubiquitina di tipo SCF (SKP1–CUL1–F-box), collegando bersagli specifici all’ubiquitinazione e alla degradazione mediata dal proteasoma. Attraverso questo ruolo, FBXO34 può influenzare la proteostasi, la progressione del ciclo cellulare e la dinamica della segnalazione regolando la stabilità degli effettori di via. Un’attività alterata del sistema ubiquitina–proteasoma è ampiamente implicata nella stabilità genomica, nelle risposte allo stress e in fenotipi rilevanti per il cancro, rendendo FBXO34 un nodo utile per studi meccanicistici sulla degradazione proteica regolata. Lo studio di FBXO34 supporta la mappatura delle vie di ubiquitinazione dipendenti da SCF e l’identificazione di substrati a valle che collegano il turnover proteico all’omeostasi cellulare.
FBXO34 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FBXO34 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FBXO34. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FBXO34. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FBXO34 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.