20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
EY-cadherinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
O Plasmídeo Double Nickase EY-cadherin (h) e o Plasmídeo Double Nickase EY-cadherin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CDH18. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EY-cadherin Anticorpo (YB.2): sc-81791