EXOSC4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405751

Visão geral

EXOSC4 codifica um componente central do complexo exossomo de RNA, uma exorribonuclease 3′–5′ multissubunidades que controla a vigilância e a renovação de RNA no núcleo e no citoplasma. Ao dar suporte ao processamento e à degradação de diversas espécies de RNA, incluindo rRNA, sn/snoRNA e transcritos aberrantes ou instáveis, EXOSC4 contribui para o controle de qualidade do RNA, a biogênese de ribossomos e a manutenção da homeostase do transcriptoma. A função do exossomo se cruza com o processamento de RNA cotranscricional, a exportação nuclear e vias de decaimento de RNA que moldam programas de expressão gênica. A desregulação de fatores associados ao exossomo tem sido relacionada a alterações no metabolismo de RNA e em respostas ao estresse celular, tornando EXOSC4 um nó relevante para estudos mecanísticos de defeitos no processamento de RNA em contextos de doença.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO EXOSC4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene EXOSC4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do EXOSC4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do EXOSC4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína EXOSC4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de EXOSC4 para a investigação da sinalização de EXOSC4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) EXOSC4 críticos para a função EXOSC4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos EXOSC4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo EXOSC4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo EXOSC4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus EXOSC4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo EXOSC4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR EXOSC4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia EXOSC4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo EXOSC4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.