ETAR Lentiviral Activation Particles (m): sc-420111-LAC

Das Mausgen **Ednra** kodiert den Endothelinrezeptor Typ A (ETAR), einen G‑Protein‑gekoppelten Rezeptor, der bevorzugt Endothelin‑1 bindet und so Vasokonstriktion, Proliferation glatter Muskelzellen und die Umgestaltung der extrazellulären Matrix reguliert. Die ETAR‑Signalübertragung koppelt vorwiegend an Gq/11 und aktiviert dadurch Phospholipase C, Ca2+-Mobilisierung und PKC; nachgeschaltet werden MAPK/ERK‑, RhoA/ROCK‑ und PI3K/AKT‑Signalwege eingebunden, die Gefäßtonus und Gewebe-Remodelling prägen. Während der Entwicklung ist **Ednra** essenziell für die von der Neuralleiste abgeleitete kraniofaziale und kardiovaskuläre Musterbildung; seine Fehlregulation wird genutzt, um Mechanismen zu modellieren, die der pulmonalen Hypertonie, Fibrose und dem vaskulären inflammatorischen Remodelling zugrunde liegen. Diese Eigenschaften machen **Ednra/ETAR** zu einem geeigneten Knotenpunkt, um die Integration von GPCR‑Signalen, kontraktile Genprogramme und das Crosstalk innerhalb des Endothelin‑Signalwegs in Endothel‑, glatten Muskel‑ und Stromazell‑Systemen zu untersuchen.

ETAR Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Ednra-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ETAR Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Ednra-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ETAR-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Ednra-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.