Partículas Lentivirales de Activación (h) ERK 5: sc-400891-LAC

MAPK7 codifica ERK5, una quinasa MAP atípica activada aguas abajo de MEK5 que integra señales mitogénicas y de estrés para regular la transcripción, la proliferación, la diferenciación y la supervivencia celular. La señalización de ERK5 se conecta con cascadas MAPK y modula la actividad de factores de transcripción como MEF2, configurando programas vinculados a la remodelación del citoesqueleto, la migración y las respuestas angiogénicas. La actividad desregulada de la vía MAPK7/ERK5 se ha asociado con un control del crecimiento alterado y con señalización inflamatoria en múltiples contextos relevantes para la enfermedad, incluidos modelos de biología oncológica y vascular. En consecuencia, MAPK7 constituye un nodo útil para analizar el diálogo cruzado entre vías, la expresión génica dependiente del estímulo y la dinámica de señalización adaptativa en células humanas.

Las partículas de activación lentiviral ERK 5 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de MAPK7 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral ERK 5 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción MAPK7, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de ERK 5. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo MAPK7 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.