Epiregulin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420224
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Epiregulin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Epiregulin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Epiregulin Anticorpo (C-9): sc-376284
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Epiregulin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420224 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Ereg** de camundongo codifica a **epirregulina**, um membro secretado da família **EGF** que se liga a receptores **EGFR/ERBB** para modular a sinalização parácrina e autócrina. A epirregulina regula a proliferação, a sobrevivência e a migração de células epiteliais e do estroma, integrando-se à atividade das vias **MAPK/ERK** e **PI3K/AKT** e moldando programas de reparo de feridas e remodelamento tecidual. A expressão de **Ereg** responde a sinais de inflamação e lesão e é frequentemente estudada em contextos nos quais a sinalização da rede EGFR se cruza com microambientes impulsionados por citocinas. A desregulação da sinalização por epirregulina tem sido associada a alterações na função de barreira, remodelamento fibrótico e circuitos de sinalização oncogênica, o que sustenta seu uso como um nó mecanístico em estudos de interações tumor–estroma e de sinalização de fatores de crescimento associada à inflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Epiregulin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ereg em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ereg, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ereg na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Epiregulin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ereg para a investigação da sinalização de Epiregulin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ereg críticos para a função Epiregulin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ereg para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Epiregulin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Epiregulin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ereg. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Epiregulin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Epiregulin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ereg para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ereg definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.