EPC2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407068

Descripción general

EPC2 (homólogo 2 del potenciador de Polycomb) codifica una proteína asociada a la cromatina que actúa como componente de las redes reguladoras del grupo Polycomb, contribuyendo al control epigenético de la transcripción. EPC2 participa en complejos multiproteicos que influyen en los estados de modificación de histonas y en la accesibilidad de la cromatina, configurando así programas que gobiernan la identidad celular, la proliferación y la diferenciación. A través de estos mecanismos, EPC2 conecta la remodelación de la cromatina con la dinámica de represión/activación transcripcional en loci regulados durante el desarrollo. La regulación epigenética dependiente de EPC2 alterada se ha investigado en el contexto de firmas de expresión génica desreguladas observadas en el cáncer y en otros trastornos con control aberrante de la cromatina.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO EPC2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen EPC2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del EPC2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de EPC2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína EPC2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en EPC2 para la investigación de la señalización de EPC2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de EPC2 críticos para la función de EPC2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de EPC2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido EPC2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido EPC2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus EPC2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR EPC2 (h) y el plásmido HDR EPC2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología EPC2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana EPC2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.