Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Endo180 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403483
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Endo180 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Endo180, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Endo180 Anticuerpo (B-10): sc-271148
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Endo180 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403483 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
MRC2 codifica Endo180 (también conocido como uPARAP), un receptor endocítico transmembrana de la familia del receptor de manosa que se une al colágeno y lo internaliza para su degradación lisosomal. Endo180 conecta la remodelación de la matriz extracelular con la adhesión y la migración celulares al regular el recambio de colágeno, la señalización asociada a integrinas y las vías de tráfico vinculadas a la endocitosis. A través de su papel en la captación de colágeno y la dinámica de la matriz, Endo180 contribuye a la remodelación del estroma y a fenotipos celulares invasivos, a menudo estudiados en contextos de biología del cáncer, fibrosis y reparación tisular. La actividad desregulada de MRC2/Endo180 se ha asociado con alteraciones de la homeostasis de la matriz extracelular y cambios del microambiente relevantes para los mecanismos de enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Endo180 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MRC2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MRC2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MRC2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Endo180.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MRC2 para la investigación de la señalización de Endo180, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de MRC2 críticos para la función de Endo180
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MRC2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Endo180 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Endo180 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MRC2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Endo180 (h) y el plásmido HDR Endo180 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MRC2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MRC2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.