Emx2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-420170-LAC

O gene Emx2 de camundongo codifica um fator de transcrição homeobox que estabelece a identidade regional durante o desenvolvimento embrionário, com papéis de destaque na padronização do prosencéfalo, do córtex cerebral e de órgãos sensoriais. O EMX2 atua em redes de regulação gênica que coordenam a proliferação de progenitores, a diferenciação neuronal e a morfogênese tecidual, integrando-se a vias de sinalização do desenvolvimento como Wnt/β-catenina, FGF e BMP. No sistema nervoso, o Emx2 influencia a arealização cortical e a organização laminar ao regular programas transcricionais que moldam o destino celular e a conectividade. A expressão ou atividade desregulada de EMX2 tem sido associada a anomalias do neurodesenvolvimento e a estados de diferenciação alterados, tornando-o um ponto útil para estudar o controle gênico do desenvolvimento e a especificação de linhagens em modelos murinos.

As Partículas de Ativação Lentivirais Emx2 (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Emx2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Emx2 (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Emx2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Emx2. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Emx2 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.