Plasmide Double Nickase (h) ELOVL5: sc-417429-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ELOVL5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ELOVL5 Double Nickase (h) et le plasmide ELOVL5 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ELOVL5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ELOVL5 Antibody (B-3): sc-374138
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ELOVL5 | sc-417429-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ELOVL5 | sc-417429-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ELOVL5 code pour une élongase qui catalyse l’allongement d’acides gras polyinsaturés à longue chaîne en acides gras à très longue chaîne, soutenant ainsi la synthèse des lipides membranaires et de médiateurs de signalisation dérivés des lipides. Elle intervient dans le métabolisme lipidique du réticulum endoplasmique et se situe à l’interface de voies qui régulent le remodelage des phospholipides, la disponibilité des précurseurs des eicosanoïdes et des docosanoïdes, ainsi que les réponses au stress cellulaire liées à la composition membranaire. Une activité altérée d’ELOVL5 a été associée à une homéostasie lipidique perturbée dans des contextes métaboliques et inflammatoires, et a été impliquée dans des phénotypes neurodégénératifs où la composition en acides gras influence la fonction neuronale. Par conséquent, ELOVL5 est largement étudiée en biologie des systèmes du métabolisme lipidique, en dynamique des membranes et dans des recherches mécanistiques fondées sur la lipidomique.
ELOVL5 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ELOVL5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ELOVL5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ELOVL5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ELOVL5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.