Plásmido Doble Nickase (h) ELOVL4: sc-407562-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ELOVL4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ELOVL4 (h) y el plásmido de doble nickasa ELOVL4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ELOVL4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ELOVL4 | sc-407562-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ELOVL4 | sc-407562-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ELOVL4 codifica una elongasa localizada en el retículo endoplásmico que cataliza la síntesis de ácidos grasos de cadena muy larga, incluidos sustratos necesarios para lípidos especializados como los lípidos retinianos y epidérmicos. Al elongar acil-CoA de cadena larga, ELOVL4 contribuye a la homeostasis lipídica, a la composición de las membranas y a la función de barrera, influyendo en vías relacionadas con el metabolismo de esfingolípidos y fosfolípidos. La alteración de la actividad de ELOVL4 modifica los reservorios de lípidos de cadena muy larga y se ha asociado con fenotipos hereditarios de degeneración retiniana y trastornos neurocutáneos, lo que subraya su relevancia para la integridad de los fotorreceptores y la fisiología cutánea. Como nodo metabólico en la interfaz entre la elongación de ácidos grasos y la remodelación lipídica de orgánulos, ELOVL4 se estudia con frecuencia en contextos de estrés lipídico, biofísica de membranas y requerimientos lipídicos específicos de cada tejido.
ELOVL4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ELOVL4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ELOVL4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ELOVL4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ELOVL4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.