ELFN1 Plasmide Double Nickase (m): sc-433965-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ELFN1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ELFN1 Double Nickase Plasmid (m) e il ELFN1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Elfn1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ELFN1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-433965-NIC | 20 µg | $410.00 |
Elfn1 codifica ELFN1, una proteina di adesione postsinaptica contenente ripetizioni ricche in leucina e un dominio di tipo III della fibronectina, che contribuisce a organizzare la connettività sinaptica nel sistema nervoso del topo. ELFN1 partecipa alla segnalazione trans-sinaptica legandosi a partner presinaptici come i recettori metabotropi del glutammato, modulando la probabilità di rilascio dei neurotrasmettitori e la plasticità sinaptica a breve termine. Attraverso queste interazioni, contribuisce alla formazione dei circuiti e all’equilibrio tra eccitazione e inibizione, processi centrali per lo sviluppo neuronale e la maturazione sinaptica. Alterazioni della segnalazione associata a ELFN1 sono state studiate nel contesto della biologia delle malattie del neurosviluppo e neuropsichiatriche, in cui la specificazione delle sinapsi e l’omeostasi delle reti risultano spesso compromesse.
ELFN1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Elfn1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Elfn1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Elfn1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Elfn1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.