EGFL6 Double Nickaseプラスミド (h): sc-411850-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- EGFL6 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- EGFL6ダブルニカースプラスミド（h）およびEGFL6ダブルニカースプラスミド（h2）は、EGFL6を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
EGFL6 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-411850-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EGFL6 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-411850-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EGFL6は、分泌性で細胞外マトリックスに関連する因子である上皮成長因子様タンパク質6（epidermal growth factor-like protein 6）をコードしており、血管系や発生過程に関わる状況で高発現することが知られています。EGFL6は、細胞―マトリックス相互作用、内皮細胞および間質細胞の挙動に寄与し、インテグリン介在性経路や増殖因子応答プログラムと交差するシグナル伝達ネットワークを介して、細胞の遊走や接着の制御に関与します。EGFL6の発現は、腫瘍微小環境でしばしば変化する組織リモデリングや血管新生プロセス、ならびに異常な血管形成を伴う他の病態とも関連づけられています。そのためEGFL6は、細胞外シグナル伝達、マトリックス構造の組織化、そしてヒト細胞モデルにおける増殖および運動性表現型の調節における役割を中心に、広く研究されています。
EGFL6 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における EGFL6 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、EGFL6内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、EGFL6の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、EGFL6が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。