Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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EAP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-408947
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EAP1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico EAP1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EAP1 Anticorpo (C-9): sc-514772
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EAP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-408947 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
IRF2BPL codifica a EAP1, uma proteína nuclear com domínio RING finger implicada no controlo transcricional e na regulação da estabilidade proteica dependente de ubiquitina. A EAP1 tem sido associada à modulação de programas de expressão génica que influenciam a progressão do ciclo celular, a diferenciação e a homeostase neuronal, em consonância com funções em proteostase e sinalização responsiva ao stress. A disrupção genética de IRF2BPL está associada a fenótipos de neurodesenvolvimento e neurodegeneração, sustentando a sua relevância em vias que regem a manutenção neuronal e a função sináptica. Assim, IRF2BPL/EAP1 é estudado em mecanismos de regulação da transcrição, degradação ligada à ubiquitinação e resiliência celular em sistemas modelo humanos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO EAP1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene IRF2BPL em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do IRF2BPL, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do IRF2BPL na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína EAP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de IRF2BPL para a investigação da sinalização de EAP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) IRF2BPL críticos para a função EAP1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos IRF2BPL para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo EAP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo EAP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus IRF2BPL. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo EAP1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR EAP1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia IRF2BPL para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo IRF2BPL definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.