EAP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-408947

概要

IRF2BPLはEAP1をコードしており、EAP1は転写制御およびユビキチン依存的なタンパク質安定性の制御に関与するとされる核内RINGフィンガータンパク質です。EAP1は、細胞周期の進行、分化、神経細胞の恒常性に影響する遺伝子発現プログラムの調節に関連付けられており、プロテオスタシスやストレス応答性シグナル伝達における役割とも整合します。IRF2BPLの遺伝学的破綻は、神経発達および神経変性の表現型と関連しており、神経細胞の維持やシナプス機能を制御する経路における重要性を示唆します。したがって、IRF2BPL/EAP1は、転写調節機構、ユビキチン化に連動したタンパク質分解（ターンオーバー）、およびヒトモデル系における細胞のレジリエンス（ストレス耐性）に関する研究で扱われています。

EAP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるIRF2BPL遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、IRF2BPL内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、IRF2BPLのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、EAP1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、EAP1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、IRF2BPL欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• EAP1の機能に不可欠なIRF2BPLエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、IRF2BPLゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• EAP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびEAP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、IRF2BPL遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  EAP1 HDRプラスミド（h）および EAP1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIRF2BPLホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIRF2BPL標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。