E-Selectin/CD62E/SELE Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400452-LAC

SELE codifica a E-selectina (CD62E), uma molécula de adesão endotelial induzível que medeia o rolamento e o recrutamento de leucócitos durante a inflamação ao ligar-se a ligantes sialilados e fucosilados em neutrófilos e monócitos. A sua transcrição é rapidamente aumentada por citocinas pró-inflamatórias como TNF-α e IL-1β, por meio das vias de sinalização NF-κB e MAPK, integrando a ativação endotelial com o tráfego de leucócitos e alterações na permeabilidade vascular. A E-selectina participa na cascata mais ampla de adesão juntamente com ICAM-1 e VCAM-1, modulando a extravasação e respostas inflamatórias específicas de cada tecido. A expressão desregulada de SELE está associada a condições inflamatórias crónicas e patologia vascular, sendo frequentemente estudada em contextos como aterosclerose, lesão de isquemia-reperfusão, disfunção endotelial associada à sépsis e angiogénese associada a tumores.

As Partículas de Ativação Lentivirais E-Selectin/CD62E/SELE (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de SELE numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais E-Selectin/CD62E/SELE (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição SELE, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de E-Selectin/CD62E/SELE. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo SELE e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.