Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
DNCLI1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412128
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- DNCLI1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico DNCLI1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DNCLI1 Anticuerpo (H-7): sc-514141
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
DNCLI1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-412128 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
DYNC1LI1 codifica la cadena ligera intermedia 1 de la dineína citoplasmática 1 (DNCLI1), una subunidad central del complejo motor dineína citoplasmática-1, responsable del transporte dirigido hacia el extremo menos a lo largo de los microtúbulos. DNCLI1 contribuye a la unión de cargas y a la regulación del motor, apoyando procesos como el tráfico de vesículas y orgánulos, el posicionamiento endosoma–lisosoma, la organización del aparato de Golgi y el transporte axonal retrógrado. A través de estas funciones, DYNC1LI1 influye en la polaridad celular, la dinámica del huso mitótico y la homeostasis neuronal, vinculando los defectos del transporte dependiente de dineína con mecanismos de enfermedades del neurodesarrollo y neurodegenerativas. La alteración de la función del complejo de dineína también es relevante para vías que regulan respuestas al estrés y la señalización intracelular, las cuales dependen de una localización precisa de las cargas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO DNCLI1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DYNC1LI1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DYNC1LI1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DYNC1LI1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DNCLI1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DYNC1LI1 para la investigación de la señalización de DNCLI1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de DYNC1LI1 críticos para la función de DNCLI1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DYNC1LI1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido DNCLI1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido DNCLI1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DYNC1LI1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DNCLI1 (h) y el plásmido HDR DNCLI1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DYNC1LI1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DYNC1LI1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.