Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
DNCLI1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-412128
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DNCLI1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico DNCLI1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: DNCLI1 Antibody (H-7): sc-514141
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DNCLI1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-412128 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
DYNC1LI1 codifica la catena leggera intermedia 1 della dineina citoplasmatica 1 (DNCLI1), una subunità centrale del complesso motore dineina citoplasmatica-1 che guida il trasporto direzionato verso l’estremità meno lungo i microtubuli. DNCLI1 contribuisce al legame con il carico e alla regolazione del motore, supportando processi quali il traffico di vescicole e organelli, il posizionamento endosoma–lisosoma, l’organizzazione dell’apparato di Golgi e il trasporto assonale retrogrado. Attraverso questi ruoli, DYNC1LI1 influenza la polarità cellulare, la dinamica del fuso mitotico e l’omeostasi neuronale, collegando difetti del trasporto dipendente dalla dineina ai meccanismi di malattie del neurosviluppo e neurodegenerative. Una funzione alterata del complesso della dineina è inoltre rilevante per vie che regolano le risposte allo stress e la segnalazione intracellulare, che dipendono da una corretta localizzazione dei carichi.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO DNCLI1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene DYNC1LI1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del DYNC1LI1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto DYNC1LI1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina DNCLI1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di DYNC1LI1 per lo studio della segnalazione di DNCLI1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni DYNC1LI1 critici per la funzione di DNCLI1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di DYNC1LI1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal DNCLI1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal DNCLI1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus DYNC1LI1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal DNCLI1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR DNCLI1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia DYNC1LI1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio DYNC1LI1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.