Dlx-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420012
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Dlx-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Dlx-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Dlx-1 Anticorpo (F-16): sc-81959
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Dlx-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420012 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Dlx1 codifica o fator de transcrição homeobox Dlx-1, um regulador de ligação ao DNA que coordena programas de expressão gênica necessários para o padrão embrionário e o neurodesenvolvimento. Em camundongos, Dlx-1 está fortemente envolvido no desenvolvimento do prosencéfalo, incluindo a especificação, migração e diferenciação de linhagens de interneurônios GABAérgicos, e também contribui para a morfogênese craniofacial e dos arcos branquiais. Por meio do controle transcricional de redes de desenvolvimento a jusante, Dlx-1 influencia decisões de destino celular, o padrão de tecidos e a maturação de circuitos neuronais. Programas gênicos associados a DLX1 desregulados têm sido relacionados na literatura a trajetórias neurodesenvolvimentais alteradas e a fenótipos oncogênicos em determinados contextos celulares, tornando-o relevante para estudos mecanísticos de diferenciação e de estados transcricionais associados a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Dlx-1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Dlx1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Dlx1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Dlx1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Dlx-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Dlx1 para a investigação da sinalização de Dlx-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Dlx1 críticos para a função Dlx-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Dlx1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Dlx-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Dlx-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Dlx1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Dlx-1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Dlx-1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Dlx1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Dlx1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.