Plasmide Double Nickase (h) DGK-ζ: sc-403843-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DGK-ζ correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DGK-ζ Double Nickase (h) et le plasmide DGK-ζ Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DGKZ. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DGK-ζ | sc-403843-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DGK-ζ | sc-403843-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La diacylglycérol kinase zêta (DGK-ζ), codée par le gène humain **DGKZ**, phosphoryle le diacylglycérol pour générer de l’acide phosphatidique, modulant ainsi l’amplitude et la durée de la signalisation des seconds messagers lipidiques. En contrôlant la disponibilité du diacylglycérol, DGK-ζ module des voies en aval, notamment la signalisation dépendante de PKC/RasGRP, et s’articule avec les sorties des réseaux PI3K–AKT et MAPK, qui influencent la prolifération, la différenciation, la migration et la survie. DGK-ζ a également été associée au remodelage du cytosquelette et au trafic membranaire via la régulation locale de pools d’acide phosphatidique au niveau de microdomaines de signalisation. Une expression ou une activité dérégulée de **DGKZ** a été associée à une signalisation altérée dans les cellules immunitaires et a été étudiée dans des contextes tels que l’inflammation et le remodelage de la signalisation lié au cancer, ce qui souligne sa pertinence pour des études mécanistiques de la transduction du signal.
DGK-ζ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DGKZ dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DGKZ. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DGKZ. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DGKZ.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.