Dematin Double Nickaseプラスミド (h): sc-405148-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Dematin Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Dematinダブルニカースプラスミド（h）およびDematinダブルニカースプラスミド（h2）は、DMTNを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Dematin Double Nickaseプラスミド (h) | sc-405148-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dematin Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-405148-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DMTNはデマチン（dematin）をコードしており、デマチンはアクチン結合性の細胞骨格制御因子として、細胞皮質および膜―細胞骨格インターフェースに豊富に存在し、フィラメントの組織化、細胞形態、機械的安定性に寄与します。デマチンはアクチン再編成機構と関連し、膜ラッフリング、接着ダイナミクス、細胞骨格とシグナル伝達複合体の連結といった過程を支えます。これらの役割を通じて、DMTNは、がん細胞の挙動などでしばしば関与する細胞構造や運動性の変化、ならびに細胞骨格の制御異常を伴う他の疾患の文脈で研究されてきました。その発現や機能の撹乱は、皮質アクチン構造、細胞の完全性、ストレス応答を司る経路を読み取るための扱いやすい指標となります。
Dematin ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における DMTN 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、DMTN内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、DMTNの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、DMTNが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。