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Delta-3慢病毒激活颗粒(m) | sc-420011-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
Delta-3慢病毒激活颗粒(m2) | sc-420011-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Dll3 基因编码 Delta-3,这是一种非典型的 Delta 样配体,在胚胎发育过程中调控 Notch 信号通路,在体节发生、神经发生以及依赖精确细胞—细胞通讯的分化程序中发挥重要作用。与经典的激活型配体不同,DLL3 往往与细胞内转运相关,并可在特定情境下抑制或微调 Notch 通路的输出,从而影响 HES/HEY 转录网络与谱系承诺。Dll3 活性受扰会破坏分节时钟动力学与椎体模式形成,使其与先天性骨骼表型及发育失调相关。因此,Dll3 常被用于研究 Notch 通路的调控机制、发育时序,以及支配细胞命运决定的转录回路。
Delta-3 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Dll3 表达。
Delta-3 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Dll3转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Delta-3表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Dll3 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。