DBR1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407375

개요

DBR1은 RNA 라리엇 디브랜칭 효소 1을 암호화하며, 이는 보존된 포스포다이에스터레이스로서 인트론 라리엇의 가지점(branch point)에 존재하는 2′–5′ 포스포다이에스터 결합을 가수분해해 절제된 인트론을 선형화하여 분해·처리(turnover)되도록 합니다. 이러한 활성은 DBR1을 스플라이소좀 의존적 RNA 처리, 인트론 분해 경로, 그리고 유전자 발현 프로그램에 영향을 줄 수 있는 RNA 항상성 유지와 연결합니다. 라리엇 디브랜칭 과정이 교란되면 원형 및 선형 RNA 종의 균형이 바뀌고, 스트레스 및 분화 환경에서 전사 후 조절이 재편될 수 있습니다. 이에 따라 문헌에서는 DBR1 기능 이상이 신경학적 표현형 및 바이러스 감수성 표현형과 연관된 것으로 보고되어 왔으며, 이는 질병 관련 세포 유형에서 RNA 대사 기전을 연구하는 데 DBR1이 중요함을 뒷받침합니다.

DBR1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DBR1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DBR1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DBR1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 DBR1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 DBR1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DBR1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• DBR1 기능에 중요한 DBR1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DBR1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• DBR1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 DBR1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DBR1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  DBR1 HDR 플라스미드 (h) 및 DBR1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DBR1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DBR1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.