DAZAP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407056

Visão geral

DAZAP2 (proteína 2 associada à DAZ) é uma proteína citoplasmática do tipo adaptador, implicada na integração de sinais proximais aos receptores com respostas transcricionais e do citoesqueleto a jusante. Tem sido associada à modulação de grandes cascatas de sinalização, incluindo Wnt/β-catenina e MAPK/ERK, influenciando a proliferação celular, a diferenciação e programas transcricionais dependentes do contexto. A DAZAP2 também se associa a componentes envolvidos em redes regulatórias de RNA e proteínas, sustentando papéis no controle pós-transcricional e em interações proteicas dependentes de sinal. Alterações na expressão de DAZAP2 ou no seu envolvimento em vias de sinalização foram relatadas em diversos conjuntos de dados relacionados ao câncer, tornando-a relevante para o estudo de reconfiguração de sinalização oncogênica e transições de estado celular em sistemas modelo humanos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DAZAP2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DAZAP2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DAZAP2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DAZAP2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DAZAP2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DAZAP2 para a investigação da sinalização de DAZAP2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DAZAP2 críticos para a função DAZAP2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DAZAP2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo DAZAP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo DAZAP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DAZAP2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo DAZAP2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR DAZAP2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DAZAP2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DAZAP2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.