Plasmide Double Nickase (h) Cytokeratin 6B: sc-401651-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Cytokeratin 6B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Cytokeratin 6B Double Nickase (h) et le plasmide Cytokeratin 6B Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant KRT6B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Cytokeratin 6B | sc-401651-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Cytokeratin 6B | sc-401651-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KRT6B code la cytokératine 6B, une protéine de filaments intermédiaires de type II qui forme des hétérodimères avec les kératines de type I afin de constituer le réseau cytosquelettique des épithéliums stratifiés. La cytokératine 6B contribue à la stabilité mécanique, à la différenciation épithéliale et au remodelage induit par le stress, en coordination avec les complexes d’adhérence desmosomaux et hémidesmosomaux pour maintenir l’intégrité tissulaire. Son expression est étroitement liée aux programmes de réparation des plaies et aux états d’activation des kératinocytes, et s’articule avec des voies contrôlant l’organisation du cytosquelette, la migration cellulaire et la fonction barrière. Une expression dérégulée de la kératine 6B ou des perturbations du réseau de kératines sont associées à l’hyperprolifération épithéliale et à des phénotypes de génodermatoses, ce qui étaye son utilisation comme marqueur et nœud fonctionnel en biologie cutanée et en recherche sur la kératinisation.
Cytokeratin 6B Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KRT6B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KRT6B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KRT6B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KRT6B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.