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CYPOR双切口酶质粒(m) | sc-422345-NIC | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Por 编码细胞色素 P450 氧化还原酶(CYPOR)。CYPOR 是一种黄素蛋白,负责将电子从 NADPH 传递给微粒体细胞色素 P450 酶及其他氧化还原伴侣蛋白。CYPOR 是氧化代谢的核心,支持多种通路,包括外源性物质清除、类固醇与脂质生物合成,以及内质网内的氧化还原稳态。POR/CYPOR 活性改变可扰乱依赖 P450 的代谢网络,从而影响对药物–基因相互作用的易感性、氧化应激反应以及与内分泌相关的表型。因此,Por 被广泛用于肝脏代谢、发育生物学以及解毒通路的系统层面调控研究。
CYPOR 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Por 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Por内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Por的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Por基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。