CUZD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407311

概要

CUZD1（CUB and zona pellucida-like domains 1）は、分泌型および膜結合型のタンパク質をコードしており、上皮細胞の分化や分泌組織の恒常性維持に関与すると考えられています。CUZD1は、タンパク質輸送や調節された分泌に関連するプロセスに関わり、腺上皮におけるJAK/STAT活性に関連する経路を含む、サイトカインシグナル伝達下流の転写プログラムとも関連付けられています。CUZD1の発現変化は、上皮由来の悪性腫瘍や炎症状態で報告されており、細胞状態の遷移、ストレス応答、腫瘍関連表現型を研究するための分子ハブとしての有用性が示唆されています。ヒトのモデル系において、CUZD1は上皮リモデリングの機構や、文脈依存的なシグナル出力を解明するための扱いやすい標的となります。

CUZD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCUZD1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CUZD1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CUZD1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CUZD1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CUZD1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CUZD1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CUZD1の機能に不可欠なCUZD1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CUZD1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CUZD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCUZD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CUZD1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CUZD1 HDRプラスミド（h）および CUZD1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCUZD1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCUZD1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。