CUL-4A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-430261

개요

마우스 Cul4a는 CUL-4A를 암호화하며, CUL-4A는 컬린(cullin) 스캐폴드 단백질로서 CUL4–DDB1 E3 유비퀴틴 리가아제 복합체의 조립을 매개해 염색질 역동성과 유전체 안정성의 핵심 조절인자들이 유비퀴틴화되고 프로테아좀에 의해 분해되도록 유도한다. CUL-4A는 뉴클레오타이드 절제 복구를 비롯한 DNA 손상 인지 및 복구 신호전달과 복제 관련 과정에 관여하며, 조절된 단백질 분해를 통해 세포주기 진행의 조율에도 기여한다. CUL-4A는 염색질에서의 단백질 항상성(proteostasis)을 형성함으로써 전사 프로그램과 유전독성 스트레스 하의 체크포인트 반응에 영향을 미친다. CUL4A 의존적 유비퀴틴화의 조절 이상은 비정상적 증식과 유전체 불안정성 표현형과 연관되어 왔으며, 이로 인해 Cul4a는 마우스 모델에서 종양성 경로의 기전 연구를 위한 유용한 표적으로 여겨진다.

CUL-4A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Cul4a 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Cul4a 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Cul4a의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CUL-4A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CUL-4A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Cul4a 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CUL-4A 기능에 중요한 Cul4a 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Cul4a 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CUL-4A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 CUL-4A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Cul4a 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CUL-4A HDR 플라스미드 (m) 및 CUL-4A HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Cul4a 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Cul4a 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.