CTDSPL2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-435953

Descripción general

Ctdspl2 codifica CTDSPL2, una pequeña proteína similar a las fosfatasas del dominio C-terminal, implicada en la regulación de la señalización dependiente de fosforilación y de programas transcripcionales. Los miembros de esta familia de fosfatasas se asocian con el control de la dinámica de desfosforilación del CTD de la ARN polimerasa II y con circuitos fosforregulatorios más amplios que influyen en la progresión del ciclo celular, la diferenciación y el mantenimiento de la identidad celular. En sistemas murinos, CTDSPL2 se utiliza como punto de entrada mecanístico para estudiar cómo los cambios mediados por fosfatasas se integran con el control transcripcional y procesos asociados a la cromatina. La alteración de la regulación de las fosfatasas del CTD y de nodos de señalización relacionados es relevante en modelos de proliferación aberrante y desregulación del linaje, lo que respalda su investigación en contextos orientados a la oncología y al desarrollo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CTDSPL2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ctdspl2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ctdspl2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ctdspl2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CTDSPL2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ctdspl2 para la investigación de la señalización de CTDSPL2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ctdspl2 críticos para la función de CTDSPL2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ctdspl2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CTDSPL2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CTDSPL2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ctdspl2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CTDSPL2 (m) y el plásmido HDR CTDSPL2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ctdspl2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ctdspl2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.