CSN8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-409800

概要

COPS8 は CSN8 をコードしており、CSN8 は COP9 シグナロソームの中核サブユニットの一つである。COP9 シグナロソームは、カリリン-RING 型ユビキチンリガーゼ（CRL）の脱ネディル化（deneddylation）を触媒することでタンパク質恒常性を制御する。この活性を通じて、CSN8 は細胞周期制御因子、転写因子、ストレス応答タンパク質などの主要分子のユビキチン依存的分解（ターンオーバー）を調節し、DNA 損傷シグナル伝達、オートファジーとプロテアソームのバランス、アポトーシスといった過程に影響を及ぼす。CSN8 の機能は、シグナル伝達や発生プログラムを制御する広範なユビキチン–プロテアソーム系およびネディル化経路と統合されている。CSN8 を含む COP9 シグナロソーム構成要素の機能異常は、がん生物学や神経変性様表現型に関わる、増殖シグナルの変化や細胞のストレス適応の異常と関連づけられている。

CSN8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCOPS8遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、COPS8内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、COPS8のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CSN8タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CSN8シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、COPS8欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CSN8の機能に不可欠なCOPS8エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、COPS8ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CSN8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCSN8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、COPS8遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CSN8 HDRプラスミド（h）および CSN8 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCOPS8ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCOPS8標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。