CRP2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-409601-LAC

CSRP2 kodiert das cystein- und glycinreiche Protein 2 (CRP2), einen LIM-Domänen-haltigen Regulator der Aktindynamik und transkriptioneller Programme, der den Umbau des Zytoskeletts mit der Genexpression verknüpft. CRP2 ist besonders in glatten Muskel- und Gefäßzellen angereichert, wo es an der Organisation von Stressfasern, der Signalübertragung an fokalen Adhäsionen sowie an differenzierungsassoziierten Signalwegen beteiligt ist, die Zellmigration und den kontraktilen Phänotyp beeinflussen. Über Interaktionen mit aktinbindenden Proteinen und transkriptionellen Koregulatoren trägt CSRP2 zu Prozessen wie Angiogenese und vaskulärem Remodeling bei. Eine fehlregulierte CSRP2-Expression wurde in kardiovaskulären und onkologischen Kontexten beschrieben, was seinen Einsatz als Ziel für mechanistische Studien zu Zellmotilität, Invasion und Gefäßbiologie unterstützt.

CRP2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CSRP2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CRP2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CSRP2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CRP2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CSRP2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.