CREM CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-400406

Übersicht

CREM (cAMP response element modulator) ist ein bZIP-Transkriptionsfaktor der CREB/ATF-Familie, der an cAMP-Response-Elemente bindet und stimulusabhängige Genexpressionsprogramme reguliert. Durch die Integration von cAMP/PKA-Signalen mit calcium- und MAPK-gekoppelten Inputs formt CREM transkriptionelle Ergebnisse, die Zellproliferation, Differenzierung und Stressantworten beeinflussen. CREM ist insbesondere in der endokrinen und reproduktiven Biologie wichtig, einschließlich der Regulation der Spermatogenese und der neuroendokrinen Genexpression, und seine isoformspezifische Aktivität kann zwischen transkriptioneller Aktivierung und Repression wechseln. Eine fehlregulierte CREM-Signalisierung wurde mit veränderten immunologischen und entzündlichen Transkriptionszuständen in Verbindung gebracht und in Kontexten wie endokriner Dysfunktion, infertilitätsbezogenen Mechanismen und krankheitsrelevanten Signalwegen neuropsychiatrischer Erkrankungen untersucht.

Das CREM CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CREM-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CREM-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CREM nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CREM-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CREM-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CREM-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CREM-Exone abzielen, die für die CREM-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CREM-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CREM CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CREM CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CREM-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CREM HDR-Plasmid (h) und CREM HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CREM-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CREM-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.