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CREB1双切口酶质粒(h) | sc-400160-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CREB1双切口酶质粒(h2) | sc-400160-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CREB1 编码 cAMP 反应元件结合蛋白 1(CREB1),这是一种 bZIP 类转录因子,可结合 CRE 基序以协调依赖刺激的基因表达。CREB1 整合来自 cAMP/PKA、Ca2+/钙调蛋白依赖性激酶以及 MAPK/ERK 通路的信号,从而塑造参与神经可塑性、代谢、细胞周期调控和应激反应等过程的基因程序。通过磷酸化依赖的共激活因子募集(如 CBP/p300),CREB1 在多种细胞类型中调控染色质状态与转录输出。CREB1 活性失调与免疫和炎症信号异常、神经精神表型以及致癌性转录网络相关,因此常被作为研究通路与疾病机制的关键节点。
CREB1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CREB1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CREB1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CREB1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CREB1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。