CD88 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419395

개요

C5ar1은 보체 아나필라톡신 C5a의 정형적 G 단백질 결합 수용체인 CD88을 암호화하며, 호중구, 단구, 대식세포를 포함한 골수계 계통 세포에서 높은 수준으로 발현됩니다. 리간드가 결합하면 CD88은 Gi 의존적 신호전달을 활성화하여 화학주성, 칼슘 동원, MAPK 및 PI3K 경로, 산화 폭발, 사이토카인 생산을 유도함으로써 보체 신호를 선천면역 활성화와 통합합니다. 이 수용체는 염증 반응의 증폭과 백혈구 유입에 관여하며, Fc 수용체 신호전달 및 패턴 인식 경로와 교차해 조직 손상과 회복 반응을 형성합니다. 조절이 깨진 C5a–CD88 신호는 패혈증, 자가면역성 염증, 허혈-재관류 손상, 신경염증 모델에서 관련성이 보고되어, C5ar1은 면역병리 기전 연구에 유용한 핵심 노드로 여겨집니다.

CD88 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 C5ar1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 C5ar1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 C5ar1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CD88 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CD88 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 C5ar1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CD88 기능에 중요한 C5ar1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 C5ar1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CD88 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 CD88 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 C5ar1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CD88 HDR 플라스미드 (m) 및 CD88 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 C5ar1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 C5ar1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.