Plásmido Doble Nickase (h) CD362/SDC2/Syndecan-2: sc-401392-NIC

SDC2 codifica el sindecán-2 (CD362), un proteoglicano transmembrana de heparán sulfato que organiza las interacciones célula–matriz al unirse a componentes de la matriz extracelular y a factores de crecimiento en la superficie celular. A través de sus cadenas de heparán sulfato y de su motivo citoplasmático de unión a PDZ, el sindecán-2 influye en la adhesión dependiente de integrinas, la dinámica de las adhesiones focales y la remodelación del citoesqueleto de actina, con impacto en la migración y la proliferación. SDC2 participa en redes de señalización que incluyen vías relacionadas con FGF, VEGF y Wnt al modular la disponibilidad de ligandos y el ensamblaje de complejos receptores, con efectos posteriores sobre la señalización MAPK/ERK y PI3K-AKT. La expresión desregulada o el desprendimiento (shedding) de SDC2 se han asociado con interacciones estromales alteradas y fenotipos invasivos en varios cánceres, lo que lo hace relevante para estudios del diálogo cruzado en el microambiente tumoral, la señalización angiogénica y el comportamiento celular asociado a la metástasis.

CD362/SDC2/Syndecan-2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SDC2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SDC2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SDC2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SDC2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.