CD2 Plasmide Double Nickase (m): sc-419537-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CD2 Double Nickase Plasmid (m) e il CD2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Cd2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD2 Antibody (RM2-5): sc-19639
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-419537-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene Cd2 del topo codifica CD2, un recettore di adesione e co-stimolazione della superfamiglia delle immunoglobuline espresso prevalentemente su cellule T e cellule NK. CD2 interagisce con ligandi quali CD58/CD48 per stabilizzare le sinapsi immunologiche, supportare la riorganizzazione del citoscheletro e modulare l’intensità della segnalazione del TCR, influenzando così l’attivazione, la produzione di citochine e le risposte citolitiche. Coordinando l’adesione cellula-cellula e le reti di segnalazione prossimali, CD2 contribuisce allo sviluppo dei linfociti e all’omeostasi immunitaria periferica. Interazioni e segnalazione dipendenti da CD2 deregolate sono state implicate nei meccanismi di malattie infiammatorie e autoimmuni e in fenotipi immunitari rilevanti per la ricerca in immunologia dei tumori.
CD2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Cd2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Cd2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Cd2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Cd2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.