CD2 Double Nickase Plasmid (h): sc-402105-NIC

CD2 kodiert einen Zelloberflächenrezeptor für Adhäsion und Signalübertragung aus der Immunglobulin-Superfamilie, der stark auf T‑Zellen und NK‑Zellen exprimiert wird und dort an Liganden wie CD58 bindet, um die Bildung der immunologischen Synapse zu stabilisieren. CD2 wirkt kostimulierend auf die Signalübertragung des T‑Zell‑Rezeptors und beeinflusst nachgeschaltete Signalwege, die den Kalziumfluss, die MAPK‑Aktivierung, die Umgestaltung des Zytoskeletts und die Zytokinproduktion steuern. Über diese Funktionen trägt CD2 zur Lymphozytenentwicklung, zur antigengetriebenen Aktivierung und zur Zell‑Zell‑Kommunikation in entzündetem Gewebe bei. Eine Fehlregulation der CD2‑vermittelten Signalgebung und Adhäsion wird mit Kontexten immunologischer Dysfunktion in Verbindung gebracht, darunter Autoimmunität und die Biologie hämatologischer Malignome, was CD2 zu einem relevanten Ansatzpunkt für mechanistische Studien in der Immunologie macht.

CD2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CD2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CD2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CD2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.

Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CD2-Störung.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.