CCDC155 Double Nickase Plasmid (h): sc-410329-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CCDC155 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CCDC155 Double-Nickase-Plasmid (h) und CCDC155 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CCDC155 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CCDC155 Double Nickase Plasmid (h) | sc-410329-NIC | 20 µg | $410.00 |
CCDC155 kodiert ein Protein mit Coiled-Coil-Domäne, das voraussichtlich als Gerüstprotein (Scaffold) fungiert und Protein-Protein-Interaktionen sowie die räumliche Organisation intrazellulärer Komplexe unterstützt. Coiled-Coil-Proteine sind häufig an der Dynamik des Zytoskeletts, am Vesikeltransport, an zentrosomenassoziierten Prozessen und an der nukleären Architektur beteiligt und verknüpfen CCDC155 damit mit grundlegenden Mechanismen, die Zellstruktur und Signalübertragung koordinieren. Obwohl CCDC155 bislang relativ wenig charakterisiert ist, kann eine Störung von Coiled-Coil-Gerüststrukturen die Genomstabilität, die Zellzyklusprogression und Stressantwort-Signalwege beeinflussen, die bei menschlichen Erkrankungen häufig verändert sind. Daher ist CCDC155 von Interesse, um kontextabhängige regulatorische Netzwerke in der Zellbiologie zu untersuchen und Genotyp-Phänotyp-Zusammenhänge in Modellsystemen zu kartieren.
CCDC155 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CCDC155-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CCDC155 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CCDC155-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CCDC155-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.