Caprin1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-424757-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Caprin1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Caprin1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Caprin1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Caprin1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Caprin1 Anticorpo (F-3): sc-518251
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Caprin1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-424757-NIC | 20 µg | $410.00 |
Caprin1 (proteína 1 associada ao ciclo celular) é uma proteína conservada de ligação a RNA que contribui para a regulação gênica pós-transcricional ao se associar a complexos ribonucleoproteicos e a grânulos de estresse. Em células de camundongo, a Caprin1 sustenta a estabilidade do mRNA e o controle da tradução, vinculando-se à sinalização proliferativa e a respostas adaptativas ao estresse celular. Ela tem sido implicada na função neuronal e sináptica, na sinalização relacionada ao sistema imune e na regulação de transcritos associados ao ciclo celular, alinhando-se a vias que coordenam crescimento, diferenciação e adaptação ao estresse. A atividade desregulada de Caprin1 tem sido associada na literatura a fenótipos do neurodesenvolvimento e a programas alterados de sobrevivência celular, tornando-a relevante para estudos mecanísticos do metabolismo de RNA e da expressão gênica responsiva ao estresse.
Caprin1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Caprin1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Caprin1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Caprin1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Caprin1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.