Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Calregulin Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419428-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CalregulinO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Calregulin (m) e o Plasmídeo Double Nickase Calregulin (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Calr. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Calregulin Anticorpo (F-4): sc-373863
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Calregulin Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419428-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Calr de camundongo codifica a calreticulina, uma chaperona ligante de Ca2+ predominantemente localizada no retículo endoplasmático (RE), onde auxilia o dobramento de glicoproteínas e o controle de qualidade por meio do ciclo calnexina/calreticulina. Ao regular a homeostase de Ca2+ no RE e interagir com proteínas recém-sintetizadas, a calreticulina influencia a sinalização de estresse do RE, a resposta a proteínas mal dobradas (UPR) e vias downstream de proteostase. O Calr também participa da adesão celular e de sinalização extracelular relevante para o sistema imune quando exposta na superfície celular, associando-o a processos ligados à inflamação. A desregulação da função da calreticulina tem sido associada a alterações na sinalização de Ca2+, estresse por mau dobramento proteico e fenótipos relevantes para oncogênese e disfunção hematopoética em sistemas experimentais.
Calregulin O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Calr em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Calr. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Calr. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Calr interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.