Plásmido Doble Nickase (h) C9orf152: sc-415979-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)C9orf152 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa C9orf152 (h) y el plásmido de doble nickasa C9orf152 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a C9orf152. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) C9orf152 | sc-415979-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) C9orf152 | sc-415979-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C9orf152 es un gen humano codificante de proteína poco caracterizado, con una anotación funcional limitada, y la evidencia actual sugiere que participa en la regulación celular fundamental más que en una única función específica de una vía. Los perfiles de expresión y los conjuntos de datos proteogenómicos emergentes pueden ayudar a situar a C9orf152 dentro de procesos más amplios como el control transcripcional, el metabolismo del ARN y las respuestas al estrés celular. Dado que los genes de marco de lectura abierto no caracterizados a menudo muestran una esencialidad dependiente del contexto, la perturbación de C9orf152 resulta útil para mapear dependencias genéticas entre distintos tipos celulares. Estos estudios respaldan la investigación de posibles asociaciones con fenotipos de enfermedades complejas mediante genómica funcional e interpretación de variantes, sin presuponer un mecanismo patogénico definido.
C9orf152 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus C9orf152 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de C9orf152. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de C9orf152. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con C9orf152 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.