C1qL2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-432618-LAC

C1ql2 codifica a C1qL2, uma proteína secretada relacionada à família C1q/TNF, enriquecida no sistema nervoso, que participa da sinalização extracelular e da organização sináptica. A C1qL2 pode interagir com receptores na superfície de neurônios e influenciar a formação e a maturação das sinapses, bem como a manutenção dos circuitos — processos intimamente ligados à plasticidade dependente da atividade. Por meio desses sinais extracelulares, a C1qL2 se conecta a vias que regulam comunicação célula–célula, adesão e conectividade neuronal. Assim, a desregulação da biologia de C1qL2 é relevante para pesquisas sobre mecanismos neurodo desenvolvimento e neurodegenerativos, nos quais alterações na estrutura e na função sináptica são fenótipos centrais.

As Partículas de Ativação Lentivirais C1qL2 (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de C1ql2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais C1qL2 (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição C1ql2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de C1qL2. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo C1ql2 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.