The Double Nickase Plasmid features a U6 promoter for sgRNA expression, a 20 nt targeting sequence, and a gRNA scaffold to guide Cas9n. It includes a CBh promoter for Cas9n (D10A) and puromycin resistance, GFP for transfection verification, and nuclear localization signals (NLS). The 2A peptide allows co-expression of Cas9n and Puro from a single promoter, enabling precise genome editing with reduced off-target effects.
c-Fos双切口酶质粒(h): sc-400009-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- c-Fos 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- c-Fos双切酶质粒（h）和c-Fos双切酶质粒（h2）编码针对FOS的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：c-Fos: sc-8047，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
c-Fos双切口酶质粒(h) | sc-400009-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
c-Fos双切口酶质粒(h2) | sc-400009-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 FOS 基因编码 c-Fos，这是一种即刻早期转录因子，可与 JUN 家族蛋白二聚形成 AP-1，从而将细胞外刺激迅速耦联到基因表达程序。c-Fos 可在 MAPK/ERK、JNK、p38 以及钙依赖性信号通路的下游被诱导，并调控转录网络，进而控制细胞增殖、分化、应激反应、凋亡和细胞运动。通过 AP-1 依赖性地调控细胞因子、基质重塑酶以及细胞周期调控因子，FOS 在多种细胞类型中整合炎症与促有丝分裂信号。FOS/AP-1 活性失衡常被用作通路激活的分子读出，并在与疾病相关的情境中与致癌信号、异常免疫激活以及神经元可塑性改变相关。
c-Fos 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 FOS 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FOS内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏FOS的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了FOS基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。