BTNL9 Plasmide Double Nickase (h2): sc-414736-NIC-2
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BTNL9 Plasmide Double Nickase (h2) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il BTNL9 Double Nickase Plasmid (h2) e il BTNL9 Double Nickase Plasmid (h22) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira BTNL9. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BTNL9 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-414736-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano BTNL9 (butyrophilin-like 9) codifica un membro della superfamiglia delle immunoglobuline implicato nella regolazione della comunicazione tra cellule immunitarie alle interfacce epiteliali e mucosali, con ruoli proposti nella modulazione delle risposte dei linfociti T e dei linfociti “innate-like” attraverso meccanismi co-regolatori correlati alle butirofiline. I pattern di espressione di BTNL9 suggeriscono un coinvolgimento nella sorveglianza immunitaria, nell’omeostasi della barriera e in vie di segnalazione infiammatorie che modellano i microambienti citochinici locali e gli stati di attivazione indotti dagli antigeni. Studi genetici e trascrittomici hanno collegato un’alterata attività di BTNL9 a patologie immunomediate e a cambiamenti del microambiente immunitario associato al cancro, sostenendone l’impiego come strumento molecolare per studiare l’immunoregolazione in contesti di malattia. L’editing genetico di BTNL9 in modelli cellulari umani consente l’analisi funzionale della segnalazione della famiglia BTNL, la valutazione degli effetti sull’attivazione linfocitaria e sul crosstalk epitelio-immunitario, nonché la validazione di varianti associate a BTNL9 in workflow meccanicistici.
BTNL9 Il plasmide Double Nickase (h2) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BTNL9 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BTNL9. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BTNL9. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BTNL9 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.