Plásmido Doble Nickase (h) BMP-8B: sc-404893-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)BMP-8B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa BMP-8B (h) y el plásmido de doble nickasa BMP-8B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a BMP8B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: BMP-8B Anticuerpo (AT13E6): sc-517391
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) BMP-8B | sc-404893-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) BMP-8B | sc-404893-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BMP8B codifica la proteína morfogenética ósea 8B (BMP-8B), un ligando secretado de la superfamilia TGF-β/BMP que señaliza a través de receptores quinasa de serina/treonina de tipo I/II para activar programas transcripcionales dependientes de SMAD1/5/9. BMP-8B contribuye a la regulación del patrón del desarrollo, la diferenciación tisular y procesos asociados a la matriz extracelular, con efectos posteriores sobre las decisiones de destino celular y la morfogénesis. En la fisiología adulta, la actividad de la vía BMP que involucra BMP8B se ha relacionado con la regulación metabólica y la biología del tejido adiposo termogénico, mientras que una desregulación más amplia de la señalización BMP se asocia con fibrosis, anomalías esqueléticas y fenotipos relacionados con el cáncer. Por ello, BMP8B se estudia con frecuencia para desentrañar dinámicas de señalización BMP específicas del contexto, el uso de receptores y el crosstalk de la vía con redes MAPK/PI3K en células humanas.
BMP-8B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus BMP8B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de BMP8B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de BMP8B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con BMP8B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.