Plásmido Doble Nickase (h) BMP-1: sc-402432-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)BMP-1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa BMP-1 (h) y el plásmido de doble nickasa BMP-1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a BMP1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) BMP-1 | sc-402432-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) BMP-1 | sc-402432-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BMP1 codifica la proteína morfogenética ósea 1 (BMP-1), una metaloproteasa secretada de la familia astacina que actúa como C-proteinasa del procolágeno y reguladora de la maduración de la matriz extracelular. BMP-1 escinde múltiples precursores y moduladores de la matriz, incluidos procolágenos fibrilares y proteínas que influyen en la señalización TGF-β/BMP, coordinando así la fibrilogénesis del colágeno, la remodelación tisular y la morfogénesis. A través de estas actividades, BMP-1 afecta vías vinculadas al depósito de matriz, la fibrosis y la reparación de heridas, y la alteración de la función de BMP1 se ha asociado con fenotipos hereditarios de tejido conectivo y fragilidad ósea. Por ello, BMP1 se estudia ampliamente en modelos celulares y tisulares para desentrañar la señalización dependiente de la MEC, la remodelación del estroma y los cambios en el comportamiento celular impulsados por la matriz.
BMP-1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus BMP1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de BMP1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de BMP1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con BMP1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.