BLVRB Plasmide Double Nickase (h): sc-405988-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BLVRB Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il BLVRB Double Nickase Plasmid (h) e il BLVRB Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira BLVRB. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: BLVRB Antibody (B-9): sc-373692
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BLVRB Plasmide Double Nickase (h) | sc-405988-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BLVRB Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405988-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BLVRB (biliverdin reductase B) codifica un’ossidoreduttasi citosolica NAD(P)H-dipendente che catalizza la riduzione della biliverdina IXβ e di tetrapirroli correlati in isomeri della bilirubina, contribuendo al catabolismo dell’eme e al mantenimento dell’equilibrio redox cellulare. Regolando i pool intracellulari di biliverdina/bilirubina e il conseguente tamponamento delle specie reattive dell’ossigeno, BLVRB collega il turnover dell’eme alle risposte allo stress ossidativo e all’omeostasi metabolica. L’enzima è espresso in numerosi tessuti ed è spesso studiato in contesti in cui la gestione di ferro/eme si intreccia con infiammazione, funzione mitocondriale e biologia eritroide. Alterazioni del metabolismo dei tetrapirroli e dello stato redox sono frequentemente investigate nelle patologie epatiche ed ematologiche, rendendo BLVRB un nodo utile per studi meccanicistici sulle vie di adattamento allo stress.
BLVRB Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BLVRB nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BLVRB. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BLVRB. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BLVRB interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.