各CRISPR/Cas9ノックアウト(KO)プラスミド製品は、ノックアウト効率を最大化するために、特定の遺伝子の同定と切断を確実にするように設計された3つのプラスミドプールから構成されています。各プラスミドはGeCKO (v2) ライブラリー由来のユニークな20 nt配列をコードしています。|HDRプラスミドはDSBに特異的なDNA修復テンプレートを提供し、CRISPR/Cas9 KOプラスミドと共導入した場合にのみ使用されます。CRISPR/Cas9 KOプラスミドと共導入する場合、HDRプラスミドには、Cas9によるDNA切断が起こった細胞を選択するためのピューロマイシン耐性遺伝子が組み込まれる。|ダブルニッカーゼプラスミドは、D10A変異Cas9ヌクレアーゼと、CRISPR/Cas9 KO対応物よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的20ntガイドRNA(gRNA)をコードするプラスミドのペアから構成される。CRISPR/dCas9 Activation Plasmidsは、遺伝子発現を特異的にアップレギュレートするようにデザインされた相乗的活性化メディエーター(SAM)転写活性化システムです。第3のプラスミドは、標的特異的20 nt非コードRNA配列、およびピューロマイシン耐性遺伝子をコードする。|CRISPR/dCas9活性化プラスミドは、1:1:1:1の質量比で3つのプラスミドから構成される。番目のプラスミドはMS2-p65-HSF1融合タンパク質とハイグロマイシン耐性遺伝子をコードする。|Cas9/gRNA複合体はプロトスペーサー隣接モチーフ(PAM)部位に結合し、DNAを巻き戻す。Cas9は3つのgRNAプラスミドが標的とする遺伝子の5'エクソンを3つの特異的部位で切断する。標的遺伝子は破壊される|Creベクター|対になるgRNA配列は、DSBを模倣するゲノムDNAの特異的なCas9媒介ダブルニッキングを可能にするために約20bpオフセットされている|CRISPR/dCas9活性化プラスミドは、1:1:1の質量比で3つのプラスミドから構成される。最初のプラスミドは、トランス活性化ドメインVP64と融合した不活性化Cas9(dCas9)ヌクレアーゼ(D10AおよびN863A)、およびブラステイジン耐性遺伝子をコードする。2番目のプラスミドはMS2-p65-HSF1融合タンパク質とハイグロマイシン耐性遺伝子をコードする。|CRISPR/dCas9活性化プラスミドは1:1:1:1の質量比で3つのプラスミドからなる。第3のプラスミドは標的特異的20ntノンコーディングRNA配列とピューロマイシン耐性遺伝子をコードする。|CRISPR/dCas9活性化プラスミドは1:1:1の質量比で3つのプラスミドからなる。最初のプラスミドは、トランス活性化ドメインVP64と融合した不活性化Cas9(dCas9)ヌクレアーゼ(D10AおよびN863A)、およびブラステイジン耐性遺伝子をコードする。各CRISPR/Cas9ノックアウト(KO)プラスミド製品は、ノックアウト効率を最大化するために、特定の遺伝子の同定と切断を確実にするように設計された3つのプラスミドプールから構成されています。各プラスミドはGeCKO (v2) ライブラリー由来のユニークな20 nt配列をコードしています。|HDRプラスミドはDSBに特異的なDNA修復テンプレートを提供し、CRISPR/Cas9 KOプラスミドと共導入した場合にのみ使用されます。CRISPR/Cas9 KOプラスミドと共導入する場合、HDRプラスミドには、Cas9によるDNA切断が起こった細胞を選択するためのピューロマイシン耐性遺伝子が組み込まれる。|ダブルニッカーゼプラスミドは、D10A変異Cas9ヌクレアーゼと、CRISPR/Cas9 KO対応物よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的20ntガイドRNA(gRNA)をコードするプラスミドのペアから構成される。CRISPR/dCas9 Activation Plasmidsは、遺伝子発現を特異的にアップレギュレートするようにデザインされた相乗的活性化メディエーター(SAM)転写活性化システムです。第3のプラスミドは、標的特異的20 nt非コードRNA配列、およびピューロマイシン耐性遺伝子をコードする。|CRISPR/dCas9活性化プラスミドは、1:1:1:1の質量比で3つのプラスミドから構成される。番目のプラスミドはMS2-p65-HSF1融合タンパク質とハイグロマイシン耐性遺伝子をコードする。|Cas9/gRNA複合体はプロトスペーサー隣接モチーフ(PAM)部位に結合し、DNAを巻き戻す。Cas9は3つのgRNAプラスミドが標的とする遺伝子の5'エクソンを3つの特異的部位で切断する。標的遺伝子は破壊される|Creベクター|対になるgRNA配列は、DSBを模倣するゲノムDNAの特異的なCas9媒介ダブルニッキングを可能にするために約20bpオフセットされている|CRISPR/dCas9活性化プラスミドは、1:1:1の質量比で3つのプラスミドから構成される。最初のプラスミドは、トランス活性化ドメインVP64と融合した不活性化Cas9(dCas9)ヌクレアーゼ(D10AおよびN863A)、およびブラステイジン耐性遺伝子をコードする。2番目のプラスミドはMS2-p65-HSF1融合タンパク質とハイグロマイシン耐性遺伝子をコードする。|CRISPR/dCas9活性化プラスミドは1:1:1:1の質量比で3つのプラスミドからなる。第3のプラスミドは標的特異的20ntノンコーディングRNA配列とピューロマイシン耐性遺伝子をコードする。|CRISPR/dCas9活性化プラスミドは1:1:1の質量比で3つのプラスミドからなる。最初のプラスミドは、トランス活性化ドメインVP64と融合した不活性化Cas9(dCas9)ヌクレアーゼ(D10AおよびN863A)、およびブラステイジン耐性遺伝子をコードする。